凱氏定氮法是由丹麥化學(xué)家凱道爾于1883年率先提出，由于設(shè)備要求簡(jiǎn)單，自提出后便成為蛋白質(zhì)測(cè)定的經(jīng)典方法，廣泛運(yùn)用于蛋白質(zhì)檢測(cè)中。凱氏定氮法通過(guò)硫酸高溫消化，只能將有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)銨，而對(duì)于硝態(tài)氮（如硝酸鹽、亞硝酸鹽）則不能轉(zhuǎn)化。因此凱氏定氮法適用于不含硝態(tài)氮的食品、農(nóng)產(chǎn)品、化妝品、醫(yī)藥等。本文為大家詳細(xì)介紹凱氏定氮法原理是什么以及凱氏定氮法的優(yōu)缺點(diǎn)。
1、凱氏定氮法原理
凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來(lái)并為過(guò)量的硼酸液吸收，再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定，就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定，可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量，蛋白質(zhì)含量=含氮量*6.25。
2、凱氏定氮法的優(yōu)缺點(diǎn)
優(yōu)點(diǎn)：
①可用于所有食品的蛋白質(zhì)分析中；
②操作相對(duì)比較簡(jiǎn)單；
③實(shí)驗(yàn)費(fèi)用較低；
④結(jié)果準(zhǔn)確，是一種測(cè)定蛋白質(zhì)的經(jīng)典方法；
⑤用改進(jìn)方法（微量凱氏定氮法）可測(cè)定樣品中微量的蛋白質(zhì)。
缺點(diǎn)：
①最終測(cè)定的是總有機(jī)氮，而不只是蛋白質(zhì)氮；
②實(shí)驗(yàn)時(shí)間太長(zhǎng)（至少需要2h才能完成）；
③精度差,精度低于雙縮脲法；
④所用試劑有腐蝕性。
其中采用凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的儀器就是凱氏定氮儀。
