葉綠素含量是指示作物葉片營養(yǎng)的關(guān)鍵性指標，因此在生理生態(tài)研究中，測定植物葉綠素含量非常重要，本文主要介紹葉綠素含量單位是什么？葉綠素含量測定用什么儀器？以及葉綠素含量測定方法詳細介紹。
1、葉綠素含量單位是什么？
在文獻中常見的葉綠素含量單位有兩種：一是以單位葉面積表示的，二是以單位葉片鮮重表示的。比較起來,還是以單位葉面積表示的較為合理、適用，因為它不受葉片含水量變化的干擾，而且也便于與以單位葉面積表示的光合速率聯(lián)系起來分析兩者關(guān)系。以單位葉片鮮重表示的葉綠素含量尤其不適用于不同生長光強、不同供水條件下生長的植物材料。在以單位葉面積表示的葉綠素含量相同時，如果以單位葉片鮮重表示，含水量高的葉片葉綠素含量值會低于那些含水量低的葉片。在水分脅迫條件下，這種偏差尤其大。
在使用儀器測定葉綠素含量時，葉綠素含量單位一般為SPAD（Soil and plant analyzer develotrnent），土壤與作物分析開發(fā)，實際指的是一種測量濃度的方法，是日本人發(fā)明的，葉綠素含量SPAD，就是指用SPAD這種方法測量的葉綠素濃度。
2、葉綠素含量測定用什么儀器？
葉綠素含量測定是可以直接使用儀器測定的，用的儀器主要就是葉綠素含量測定儀，它通過測定植物的SPAD值含量，來表示葉片的綠色程度。
3、葉綠素含量測定方法詳細介紹
3.1、實驗原理
葉綠素有葉綠素a和葉綠素b兩種類型。葉綠素a、葉綠素b的內(nèi)酮提取液在紅光區(qū)波長663nm和645nm處分別具有最大吸收峰。在波長663nm處，葉綠素a、葉綠素b的80%丙酮提取液的吸光系數(shù)分別為82.04和9.27，在波長645nm處測分別為16.75和45.60。根據(jù)加和性原則，可得出葉綠素溶液在波長663nm和645nm處的吸光度Aw和Ao1s與葉綠素溶液中葉綠素a和葉綠素b的質(zhì)量濃度pa和pb(以mg/L為單位)的關(guān)系，推導出Amon計算公式。
將pa與pb相加即得葉綠素總量P：
此外，葉綠素a、葉綠素b在波長652nm處吸收峰相交,兩者有相同的吸光系數(shù),均為34.5。因此，葉綠素總量pτ還可在652um處測定：
因此，根據(jù)葉綠素的丙酮提取液對可見光譜的吸收特性，利用分光光度計在相應(yīng)波長處測定提取液的吸光度值，按照前面的公式就可以計算出提取液中葉綠素的含量。再根據(jù)果蔬樣品質(zhì)量和提取液的體積，可以計算出果蔬組織中葉綠素的含量。
3.2、實驗步驟
(1)稱取1.0g果蔬樣品放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3mL80%丙酮溶液,研成勻漿，再加10mL80%丙酮溶液繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min提取。
(2)取一張濾紙，折疊后置于漏斗中，用80%丙酮潤濕,沿玻璃棒將提取液倒入漏斗中，過濾到50mL棕色容量瓶中，沖洗研缽、研棒和殘渣數(shù)次，最后連同殘渣--起倒人漏斗中，用丙酮溶液沖洗，直至濾紙和殘渣中無綠色為止。
(3)最后用80%丙酮溶液定容至50mL,搖勻。注意，各器皿、用具在使用之前必須用80%丙酮溶液潤洗。
(4)按前面的Amon公式計算得提取液中葉綠素a和葉綠素b的質(zhì)量濃度,再按下式計算果蔬組織中葉綠素的含量，以每克果蔬組織鮮重中所含葉綠素的質(zhì)量表示，即mg/g。計算公式：
式中p一由公式計算得葉綠素的質(zhì)量濃度，mg/L；V一樣品提取液總體積，mL；m—樣品質(zhì)量，g。
